Margo Martindale nasceu em 18 de julho de 1951 em Jacksonville, Texas, para Margaret (Pruitt) e William Everett Martindale, proprietário de uma empresa madeireira e manipulador de cães. Ela é a mais nova de três filhos e a única filha. Margo freqüentou o Lon Marris College, e depois transferiu-se para a Universidade de Michigan em Ann Arbor, e fez um estudo de verão na Universidade de Harvard. Ela fez sua estréia no cinema em Days of Thunder (1990), ela desempenhou o papel menor de Donna. Papéis notáveis incluem: Irmã Colleen, a irmã de Susan Sarandon em Dead Man Walking (1995). Ela desempenhou um papel breve mas memorável como a mãe egoísta do personagem de Hilary Swank em Million Dollar Baby (2004).
