Charles Middleton nasceu em 3 de outubro de 1874 em Elizabethtown, Kentucky.Ele era filho de um milionário e não precisava trabalhar, mas aparentemente começou a atuar porque precisava encontrar uma maneira de se expressar.Ele trabalhou em um circo itinerante, no vaudeville e atuou em teatro antes de se voltar para o cinema em 1920.Sua carreira como ator de personagem floresceu com o advento dos filmes sonoros.Sua voz de barítono sinistra era perfeita para papéis de vilão, e ele se tornou um excelente contraponto para as estrelas da comédia Harold Lloyd, Eddie Cantor, Wheeler e Woolsey e Stan Laurel e Oliver Hardy.Middleton foi escalado para Safe in Hell (1931), da Warner Brothers, e The Strange Love of Molly Louvain (1932), contracenando com Ann Dvorak e Richard Cromwell.Suas outras performances notáveis durante este período foram ambas lançadas no ano seguinte pela Paramount Pictures: primeiro como o promotor distrital em This Day and Age (1933) dirigido por Cecil B.DeMille, e depois como promotor ao lado de The Marx Brothers in Duck Soup (1933).Ele também interpretou o xerife Ike Valton, o oficial que tenta prender Julie La Verne (Helen Morgan) e seu marido por terem se casado ilegalmente na versão da Universal Pictures do musical Show Boat (1936).
Os traços duros de granito de Middleton se assemelham aos de Abraham Lincoln.Ele interpretou Lincoln em um curta-metragem de serviço público, The Road Is Open Again, em um raro papel cômico como um ator exasperado por ser rotulado como Lincoln na comédia Stand-In (1937), e interpretou o pai de Lincoln no filme versão de Robert E.Abe Lincoln de Sherwood em Illinois (1940).Middleton também apareceu em muitos seriados de aventura de 1935 a 1947.Ele é mais famoso por seu papel de vilão como o malvado Imperador Ming, o Impiedoso nas três séries de Flash Gordon: Rocket Ship (1936), Flash Gordon's Trip to Mars (1938) e Flash Gordon Conquers the Universe (1940).Ele também apareceu em seriados como Dick Tracy Returns (1938), Daredevils of the Red Circle (1939) e Jack Armstrong (1947).Charles Middleton morreu aos 74 anos de ataque cardíaco em 22 de abril de 1949 em Los Angeles, Califórnia.Ele foi enterrado no Cemitério Hollywood Forever ao lado de sua esposa de muitos anos, a atriz de teatro e cinema Leora Spellman.
