Jordana Ariel Spiro nasceu em 12 de abril de 1977 em Manhattan, Nova York. Ela foi criada em Manhattan e estudou no Círculo na Square Theatre School. Ela também participou brevemente da Royal Academy of Dramatic Arts, em Londres. Spiro divide seu tempo entre Los Angeles e Nova York. Além de atuar, Spiro é apaixonado pela fotografia e produziu e dirigiu vários curtas. No outono de 2009, ela iniciou o Programa de Mestrado em Cinema na Columbia University.
Spiro começou sua carreira de atriz na década de 1990 aparecendo em programas de TV e filmes de TV: Maybe This Time (1995), Sua Última Chance (1996), Se estas Muralhas Poderiam Falar (1996), Buffy, a Caça Vampiros (1997), Seda Stalkings (1991), Beverly Hills, 90210 (1990) e City Guys (1997). Ela conseguiu seus primeiros papéis recorrentes em One World (1998) e Undressed (1999). Seu primeiro papel regular foi no curta The Huntress (2000), a filha caçadora de recompensas de Annette O'Toole. Depois de The Huntress ela participou principalmente de programas de TV, como Out of Practice (2005), CSI: NY (2004), Cold Case (2003) e teve um papel recorrente em JAG (1995) como a tenente Catherine Graves.
Ela também apareceu em longas-metragens: Must Love Dogs (2005), Parceiro (s) (2005), Alone with Her (2006), Living & Dying (2007), O Ano de Conhecer-nos (2008) e Trespass (2011) ). Ela estrelou a comédia da TBS My Boys (2006) como P.J., uma garota de vinte e poucos anos, que tenta encontrar um romance dentro de seu mundo dominado por amigos do sexo masculino. "My Boys" terminou em 2010 depois de quatro temporadas. Ela também apareceu em The Goods: Live Hard, Sell Hard (2009), de Neal Brennan, contracenando com Jeremy Piven, Ed Helms e Rob Riggle. Em 2011, ela teve um papel recorrente na Lei de Harry (2011) como Rachael Miller. Ela também estrelou Dexter (2006) e teve um papel recorrente como a detetive Jenna Villette em The Good Wife (2009). Ela foi a protagonista em The Mob Doctor (2012), mas infelizmente foi cancelada após 13 episódios. Além de convidado estrelado por Tyrant (2014) e Royal Pains (2009), ela teve um papel recorrente desde 2015 no sucesso da NBC Blindspot (2015) como Sarah Weller.
