June Whitfield teve uma carreira longa e bem-sucedida que incluiu teatro musical, filmes e inúmeras apresentações de rádio e televisão. Sua mãe gostava de teatro amador e June teve aulas de elocução e dança desde cedo. Ela frequentou a Royal Academy of Dramatic Art e trabalhou no teatro. Uma de suas primeiras experiências foi trabalhar com Wilfred Pickles, cujo grande talento cômico e dom para o tempo a impressionou bastante.
Ela se tornou um nome familiar na comédia de rádio "Take It From Here" em 1953, uma época em que o rádio era muito mais popular do que a televisão. Quando a televisão superou o rádio em popularidade, June fez uma transição bem-sucedida. Nos anos seguintes, ela trabalhou com a maioria dos maiores nomes da comédia, incluindo Arthur Askey, Tony Hancock, Frankie Howerd, Benny Hill, Harry H. Corbett, Wilfrid Brambell, Ronnie Barker, Richard Briers, Eric Morecambe e Dick Emery.
Ela se tornou uma dupla de televisão com Terry Scott em Happy Ever After (1974) e Terry e June (1979). Ela também apareceu em três episódios da popular série de filmes Carry On, Carry on Nurse (1959), Carry on Abroad (1972) e Carry on Girls (1973).
Na década de 1980, June Whitfield era vista por alguns membros da cena da comédia alternativa como uma representação do tipo de comédia tradicional e segura contra a qual eles estavam reagindo. No entanto, ela ainda tinha seu talento para um timing cômico perfeito e sua gama de vozes, o que a permitiu continuar trabalhando. Ela voltou para mais teatro e rádio, incluindo The News Huddlines, um programa de rádio satírico liderado por Roy Hudd. Em 1992, ela apareceu em Carry on Columbus (1992), uma tentativa fracassada de ressuscitar a série Carry On. No mesmo ano, ela iniciou um empreendimento de maior sucesso, Absolutely Fabulous (1992), que se tornou uma das comédias mais populares da década e a colocou de volta nos holofotes.
