Guido Santi começou a trabalhar no cinema na Itália. Ele foi aluno do diretor Ermanno Olmi em um grupo chamado "Cinema Ipotesi". Seu primeiro curta-metragem, Concertino, foi co-dirigido com seu amigo de longa data Marco Simon Puccioni e foi produzido pela RAI, a emissora pública italiana. Puccioni e Santi então se mudaram para os Estados Unidos estudando em duas escolas de cinema separadas. Puccioni estudou na CalArts, enquanto Santi foi admitido na University of Southern California, onde fez mestrado em produção cinematográfica. Depois de se formar, ele passou a produzir especiais de TV e documentários e a lecionar cinema em escolas de cinema dos Estados Unidos. Junto com sua companheira Tina Mascara, ele co-fundou a "Asphalt Stars Productions".
Santi tornou-se amigo de Don Bachardy em 1992, parceiro de longa data de Christopher Isherwood. Por fim, Santi filmou o documentário de sucesso Chris & Don, lançado em 2008.
Santi ensinou Estética Cinematográfica e História do Cinema no College of the Canyons em Santa Clarita, Califórnia, onde morreu repentinamente em 4 de fevereiro de 2019 devido a um ataque cardíaco no primeiro dia do semestre de primavera do College of the Canyon
