Rebecca Root nasceu em Woking, Surrrey, Inglaterra em 1969 e foi identificada como homem ao nascer. Ela se mudou para a zona rural de Oxfordshire quando tinha 11 anos e estudou na Bartholomew School, Eynsham. Quando jovem, ela atuou com grupos de teatro locais, bem como no prestigioso National Youth Theatre of Great Britain, onde foi contemporânea de Lucy Briers, Jonathan Cake e Daniel Craig. Em 1987 ela se mudou para Londres em tempo integral a fim de treinar como atriz na Mountview Academy of Theatre Arts.
Após a formatura em 1990, Rebecca começou a trabalhar em uma série de produções de televisão e teatro, notadamente Mantendo as Aparências (1990), Casualty (1986), The Lady's Not For Burning, Hamlet e Tartuffe.
Quando Rebecca Root se aproximou dos 30 anos, sempre tendo lutado com sua identidade de gênero, ela percebeu que precisava fazer a transição para a mulher e, consequentemente, deu um hiato em sua carreira de performance, durante o qual ela obteve seu mestrado em Estudos da Voz na Royal Central School of Speech and Drama, University of London, e desenvolveu sua prática como professora de voz.
No entanto, Root nunca fechou completamente as portas para a atuação, e a sitcom da BBC2 Boy Meets Girl (2015) (2015) marcou um momento significativo em sua carreira quando ela se tornou a primeira atriz trans a aparecer em um papel trans em uma comédia da televisão britânica. No mesmo ano, ela fez sua estreia no cinema ao lado de Eddie Redmayne e Alicia Vikander em The Danish Girl (2015). Mais aparições em filmes, TV, rádio e teatro se seguiram e Rebecca rapidamente se tornou um rosto popular na indústria da performance.
Ela é uma defensora apaixonada dos direitos LGBT e da aceitação social, e é Patrona das instituições de caridade Diversity Role Models e Liberate Jersey.
Rebecca continua trabalhando como treinadora de voz, trabalhando principalmente com clientes trans, ao lado de uma agenda cada vez mais ocupada de atuação. Ela mora em Highgate, Londres, com sua parceira Elizabeth Menabney.
